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技术支持

凯氏定氮仪使用前如何清洗

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凯氏定氮仪是利用凯氏定氮法对物质中蛋白质含量进行测定的专用仪器。凯氏定氮仪按其配置分,可以分为全自动凯氏定氮仪和半自动定氮仪。其中全自动凯氏定氮仪包括消化炉和凯氏蒸馏装置。凯氏定氮仪操作时可以分为人工模式和自动模式,不同的实验者,可以根据对实验操作的熟练程度,自由选择哪种方式。一般的,新手我们推荐使用自动模式,可以为你省去很多的步骤。目前,凯氏定氮仪已经广泛使用于测定乳核乳制品中蛋白质的测定。

下面我们主要介绍下,我们在使用全自动凯氏定氮仪测定蛋白质含量时,如何清洗定氮仪。

仪器安装前,凯氏定氮仪各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上。

仪器使用前,微量全部管道都须经水蒸气洗涤,以除去管道内可能残留的氨,正在使用的仪器,每次测样前,蒸气洗涤5min即可。较长时间未使用的仪器,重复蒸气洗涤,不得少于三次,并检查仪器是否正常。仔细检查各个连接处,保证不漏气。这样,一方面保证了仪器的清洁,另一方面,也同时对仪器进行了检查,一些坏的零部件,可以及时被查出并替换。

仪器安装完后,我们需具体对仪器的内部进行清洁。首先在凯氏定氮仪蒸气发生器中加约2/3体积蒸馏水,加入数滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影响结果,并放入少许沸石(或毛细管等),以防爆沸。这个步骤有点类似于凯氏定氮法的消化前步骤,用相应的试剂对其进行清洗。沿小玻杯壁加入蒸馏水约20mL让水经插管流入反应室,但玻杯内的水不要放光,塞上棒状玻塞,保持水封,防止漏气。这一步可直接验证插管是否可以使用。蒸气发生后,立即关闭废液排放管上的开关,使蒸气只能进入反应室,导致反应室内的水迅速沸腾,蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球进入冷凝管冷却,在冷凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水。从定氮球发烫开始计时,连续蒸煮5min,然后移开煤气灯。冲洗完毕,夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管,由于气体冷却压力降低,反应室内废液自动抽到反应室外壳中,打开废液排出口夹子放出废液。整个清洗过程,到这里就结束了,经过清洗这个过程,仪器内部环境已经符合我们测定蛋白质含量的需求,另外,仪器的各部件也得到了检验,可以及时更换漏气或者其他坏了的部分。根据以上步骤重复清洗23次,再在冷凝管下换放一个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶使冷凝管下口完全浸没在溶液中,蒸馏12min,观察锥形瓶内的溶液是否变色。如不变色,表示蒸馏装置内部已洗干净。移去锥形瓶,再蒸馏12min,用蒸馏水冲洗冷凝器下口,关闭煤气灯,仪器即可供测样品使用。

这样,凯氏定氮仪整个清洗过程就结束了。凯氏定氮仪在测定蛋白质含量前,一般都需要经过清洗,这样对于测定结果,会更加精确。另外,也可以保证实验室人员的安全,因为在清洗过程中,对仪器进行了检查,排除了因为仪器的故障而造成了危险。

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